1、檢查和開啟電源開關。

　　2、每次滅菌前都應檢查貯水和開啟進水閥加水，達到水位后關閉進水閥。

　　3、有序擺放滅菌物品，相互之間應保持有間隙地放入滅菌室內，有利于蒸汽的穿透，確保滅菌效果。敷料消毒擺放時不宜緊靠滅菌室門，以免蒸汽的冷凝水沿著門壁滴在敷料上，以致敷料吸收過多水份潮濕造成滅菌結束時不易干燥。

　　4、將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。

　　5、放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免妨礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。

　　6、加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。

　　7、用電爐或煤氣加熱，并同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣。待冷空氣*排盡后，關上排氣閥，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內壓力升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。本實驗用1．05kg/cm2，121．3℃，20分鐘滅菌。

　　8、滅菌所需時間到后，切斷電源或關閉煤氣，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的壓力降至0時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。

　　9、將取出的滅菌培養基放入37℃溫箱培養24小時，經檢查若無雜菌生長，即可待用。

　　10、消毒滅菌時間到后，按照各種不同消毒物品的要求，任由滅菌室內的蒸汽自然冷卻或予以慢排或快排。消毒后使之干燥，可將總閥。當滅菌室壓力表下降至“0”位后，再候1-2分鐘，方可緩慢地轉動轉盤和撥動緊鎖手柄，將門開啟4-5厘米，再候10-15分鐘，然后將消毒物品取出，即能干燥。

　　11、如不連續消毒滅菌，就將電源或蒸汽開關關閉，隨后將總閥撥至全排，排去套層內的蒸汽并將大門開啟少許，散發滅菌室內的剩余蒸汽，使滅菌室內壁經常保持干燥。

　　高壓滅菌器的注意事項：

　　1.滅菌物不可放的過于密集。

　　2.不要讓滅菌物品堵塞住滅菌器箱室內的孔和溫度傳感器，也不要讓傳感器受力。

　　3.滅菌鍋使用前需將鍋內冷空氣排盡，以免因溫度達不到影響滅菌效果。

　　4.滅菌器開啟后不能強行打開滅菌器蓋子，以免發生意外。

　　5.滅菌器內壓力要基本恢復到大氣壓方可開啟滅菌器蓋子。

　　6.滅菌結束時，不能放氣減壓，否則瓶內液體會劇烈沸騰沖掉瓶蓋，嚴重時會導致容器爆裂。

　　7.滅菌器運行完畢2小時以上，讓蓋子打開狀態下排放加熱用水。